【摘 要】
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目的:研究雷公藤甲素诱导肝细胞L-02凋亡的作用机制。方法:体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的毒性作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态的改变,流式细胞
【机 构】
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湖南省药品审评认证与不良反应监测中心,中南大学湘雅二医院,中国药科大学国家新药筛选中心
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目的:研究雷公藤甲素诱导肝细胞L-02凋亡的作用机制。方法:体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的毒性作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态的改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot法检测人抗兔p53、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)与线粒体、胞浆中细胞色素C(Cyt-c)的表达。结果:不同浓度雷公藤甲素(60、120、180nmol/L)与同样浓度(120nmol/L)不同作用时间(12、24、48h)作用L-02细胞,雷公藤甲素对细胞的抑制作用与浓度或时间呈正相关;Hoechst33258染色可见细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;Westernblot法显示120nmol/L雷公藤甲素作用后,细胞p53、Bax与胞浆中Cyt-c表达显著增强(P<0.05),而Bcl-2与线粒体中Cyt-c表达显著减弱(P<0.05)。结论:雷公藤甲素体外可诱导L-02细胞凋亡,其作用机制可能与Bcl-2与线粒体中Cyt-c表达下调和p53、Bax与胞浆中Cyt-c表达上调有关。
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