【摘 要】
：
构建p53基因RNA干涉DNA片段的目的,是将其应用于植物悬浮培养中的细胞周期调节.依据拟南芥p53基因与其他高等植物具有高度保守区域的特点,合成其两个区域的核苷酸片段(Ⅰ和Ⅱ
【基金项目】
：
天津市应用基础及前沿技术研究计划项目(08JCZDTC15300)
论文部分内容阅读
构建p53基因RNA干涉DNA片段的目的,是将其应用于植物悬浮培养中的细胞周期调节.依据拟南芥p53基因与其他高等植物具有高度保守区域的特点,合成其两个区域的核苷酸片段(Ⅰ和Ⅱ)及其相应的反向片段(Ⅰ′和Ⅱ′),并在Ⅱ和Ⅱ′端部分别引入内含子两个端部核苷酸序列.在相互连接后进行PCR选择扩增,其产物再与克隆载体连接并经过蓝白斑筛选获得重组DNA;在电泳和核苷酸测序鉴定后表明,最终得到了Ⅰ–5′–内含子–Ⅱ′–Ⅱ–内含子–3′–Ⅰ′序列的重组DNA片段.该片段两端含多克隆位点,通过插入植物的表达载体进入细胞基因组,在细胞中其转录产物将形成发夹结构,经胞内酶切后可以形成短的双链RNA片段,将具有干涉p53基因表达的功能.
其他文献
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，化疗在晚期乳腺癌治疗中占有重要的地位。我院自2003年8月至2005年7月应用盖诺联合顺铂（NP方案）治疗晚期乳腺癌36例，在治疗和护理方面取得较好
目的探讨血小板衍生生长因子(PDGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义.方法应用免疫组织化学技术观察了PDGF-A链和PDGF-B链在16例肺鳞癌及5例肺腺癌中的表达,并与其在肺非
目的探讨细胞间粘附分子1(ICAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)在支气管哮喘(哮喘)、慢性阻塞性肺病(COPD)发病机制中的作用和吸入皮质激素对哮喘、COPD患者的影响.方法60例COPD急性
ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
<正>监狱行刑客观存在悖论现象,最典型的体现莫过于对犯罪者适用刑罚后羁押于监禁场所执行刑罚,主观上追求的是罪犯的再社会化,但在客观上由于监禁刑的内容尤其是执行方式常
目前市面上保健品种类层出不穷,如何让客户快速相信保健品的有效性和合理性,是当下各大保健品企业的关注点。而保健品体验服务是商家觉得能够解决这一难题的重要方法之一。因
患者,女性,67岁.因左腰部胀痛10年入院.查体无明显异常发现,腹部平片显示腰3,4椎体旁有约3cm×5cm高密度影,静脉肾盂造影显示:双肾功能正常,左肾盂轻度积水,输尿管未显示
目的评估常规体外受精(in vitro fertilization,IVF)受精失败或低受精率周期中自然受精卵母细胞与补救受精卵母细胞受精后发育潜能及预后。方法对短时受精失败或低受精率的11
目的:分析三倍体胎儿孕早期的母体绒毛膜促性腺激素水平的变化规律和超声表现的特征。方法:2014年5月12日至2014年10月31日期间在杭州市中医院诊治的早期自然流产患者,流产前