【摘 要】
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利用加端PCR技术在pGEX-1λT质粒Bam H Ⅰ和PstⅠ位点间(片段BamH Ⅰ端)加入α-amanitin线性八肽碳骨架编码序列,再将两次连续加端PCR产物连入BamH Ⅰ、PstⅠ双酶切的pGEX-1
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利用加端PCR技术在pGEX-1λT质粒Bam H Ⅰ和PstⅠ位点间(片段BamH Ⅰ端)加入α-amanitin线性八肽碳骨架编码序列,再将两次连续加端PCR产物连入BamH Ⅰ、PstⅠ双酶切的pGEX-1λT载体,得到含α-amanitin线性碳骨架编码序列的阳性重组子pGAT-1.序列测定和结果分析显示,构建的融合基因相位正确,阅读框通读.通过对融合基因在大肠杆菌中表达条件的优化,目的融合蛋白的表达量可提高33.5%,占总蛋白表达量的28.3%.
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