【摘 要】
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目的应用RNA干扰技术降低细胞内骨桥蛋白的表达水平,研究骨桥蛋白对人肝癌细胞侵袭性的影响。方法体外化学合成骨桥蛋白序列特异性双链RNA,转染高转移肝癌细胞株HCC-LM3,用实
【机 构】
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复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科,复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科,复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科,复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科,复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科,
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目的应用RNA干扰技术降低细胞内骨桥蛋白的表达水平,研究骨桥蛋白对人肝癌细胞侵袭性的影响。方法体外化学合成骨桥蛋白序列特异性双链RNA,转染高转移肝癌细胞株HCC-LM3,用实时定量PCR和Western blot检测骨桥蛋白的表达。通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验,观察肝癌细胞恶性生物学行为的改变。结果骨桥蛋白特异性小干扰性RNA (siRNA)转染组的HCC-LM3细胞,骨桥蛋白mRNA水平下降79%,蛋白水平下降81%。体外实验表明,与空白对照组及非特异性siRNA转染组相比,骨桥蛋白特异性siRNA转染组HCC-LM3细胞克隆形成数目下降,穿过人工基底膜的细胞数减少(P＜0．05)。结论降低骨桥蛋白的表达可显著抑制肝癌细胞的侵袭转移能力。
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