一种能促进皮肤中透明质酸合成的新型美容多肽

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  前言
  
  近年来,玻尿酸(俗称透明质酸,HA)因为其作为化妆品成分的应用受到了广泛的关注。它最为卓越的特性在于它能锁住大约1000倍自身重量的水分。但是,作为化妆品成分,透明质酸在使用方面也有一些缺点。如果能正确使用,它能在肌肤表面起到极好的保湿效果。但是即使分子粒径从3MD百下降到大约50KD,透明质酸的短链依然因为太大而无法正常渗透入肌肤。注射是将透明质酸运送到正确位置的一种方法。但是累积重复注射并不是运用化妆品活性成分的最方便的方法。
  因此,我们一直在寻找另一种合适的方法,能够使化妆品成分刺激肌肤自身的功能,从而提升透明质酸的水平。
  


  
  产品描述
  
  实验首先筛选了450种缩氨酸。这些缩氨酸都是为了刺激I型胶原蛋白而设计的,能刺激透明质酸的合成。对筛选出的结构进行进一步的分析,并将优化过的缩氨酸进行测试。最后,我们选择了如图1所示的三肽作为化妆品活性成分的开发对象。
  我们发现,三肽1不仅促进了透明质酸的合成,同时也加强了核心蛋白聚糖和基膜聚糖的水平。这两种蛋白聚糖能控制胶原纤维的直径,对胶原纤维的性质起到很重要的作用。蛋白聚糖是由一条或多条糖或糖的衍生物链经过修饰而组成的蛋白质。
  三肽是由1000ppm的缩氨酸溶于水溶性丙三醇溶液,不添加乳化剂、防腐剂、聚乙二醇、植物乳化剂、硅胶或聚合物等添加剂。
  溶液包含370ppm的氯化镁。
  
  体外功效
  
  透明质酸
  


  实验在96孔板细胞培养板上培养了正常人体纤维母细胞(NHF)。三天后,加入不含胎牛血清的适量1号缩氨酸,继续培养三天。实验采用ECHELON公司(盐湖城,美国犹他州)的透明质酸分析设备测量了成长中期分泌的透明质酸。图2说明了当1号缩氨酸浓度为12.5μmol/L时透明质酸增加了302%。
  
  核心蛋白聚糖及基膜聚糖合成
  
  实验在96孔板细胞培养板上培养了正常人体纤维母细胞(NHF)。三天后,加入不含胎牛血清的适量1号缩氨酸。采用酶联免疫法(EIA),通过4%的多聚甲醛固定细胞,用0.5%的氚核-X100浸泡。然后用5%的脱脂牛奶封闭非特定的结合部位。细胞培养板一式两份,分别用如下之一的方式培养。
  采用山羊抗基膜聚糖(L-20)抗体(santaCruz Biotechnology,sc-27718)培养细胞给基膜聚糖着色。该抗体采用山羊抗小鼠HRP共轭二抗体(Pierce)检测。
  采用山羊抗核心蛋白聚糖抗体(R&D系统,AF143)培养细胞并给核心蛋白聚糖着色。采用兔抗羊HRP共轭二抗体(Pierce)检测。
  在添加了基质后用酶标仪(Multiskan Ascent,Thermolabsystems)在492nm处对目标合成物进行测量。图3显示了在剂量为12.5μmol/L时,三肽1对基膜聚糖及核心蛋白聚糖的合成影响达到稳定。
  
  体内功效
  
  我们在双盲体内实验中对40名女性志愿者(55-65岁,有明显的面部及上臂肌肤松弛现象)进行实验,研究了新化学活性成分的功效。志愿者们每天两次在面部及上臂使用含25ppm三肽1的配方乳液。
  图4显示了两个月后的治理功效。通过cutometer测定仪分别检测了紧实度、拉张性及弹性这几个生物力学参数。
  


  两三个月后,运用primos身体技术对双下巴在垂直面上的改变进行了记录。图5显示了与DO相比,在面上有明显的改变。这种改变是任何对照组都无法达到的。
  
  安全性及生态性
  
  标准且明确的安全性实验表明:三肽1用于化妆品中是安全的。获得的数据表明产品对环境没有任何危害性影响。整个制造过程符合责任关怀计划的标准,即产品是安全、健康的,且从保护人类及环境的角度出发。
  
  配方
  
  用三肽1做面霜、凝胶、乳液等的配方非常简单。通常情况下,该原料可在最后一步添加香精时添加。如果配方需要在高温下增加原料,三肽可在80℃下稳定两个小时,而不会降解。配方包括原料可以适应的pH值范围很广,3-7之间变化能保证其稳定。即使在10%的溶液中它在50℃下放置两个月之后仍然可保持稳定。这说明那些微不足道的氯化镁对配方的稳定性没有任何影响。
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