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【摘 要】 目的：建立碱滴定法在紫菀二氧化硫残留量测定并考察方法学。方法：采用碱滴定法测定紫菀二氧化硫残留量，通过重复性、线性等因素的考察建立符合紫菀二氧化硫残留量测定的方法。结果：采用碱滴定法测定紫菀中二氧化硫残留量的线性关系良好，其中Y=1.4055X+0.0221，R2=0.9998，回收率在92.16%～102.36%之间，重现性良好（RSD=2.8%， n=6），检测限为12.5mg/kg。结论：该法操作简单，准确度高。
【关键词】 紫菀；二氧化硫；滴定
【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）12-0033-02
Abstract：Objective To establish a method for determination the residues of sulfur dioxide.in Aster by base titration. Methods The method was applied to determinate the residues of sulfur dioxide in aster， the repeatability， linearity， etc. Factors， which were investigated.Results The linear relationship with the amount of good， y=1.4055x+0.0221， r2=0.9998. Recovery rate between the 92.16%～102.36% and reproduce well （RSD=2.8%，n=6）， and the detection limit is 12.5mg/kg. Conclusion the method is simple and accurate.
Keywords：aster；sulfur dioxide；titration
硫磺熏蒸中药材具有防虫、杀虫、防腐等作用，也是中药材有效的干燥方法之一[1-2]。部分中药材加工过程中，多会采用硫磺熏蒸作为售前的处理程序之一。研究表明，药材中二氧化硫过量残留不仅可破坏中药的有效成分，而且对人类健康造成严重威胁，引起服用者咽喉疼痛、胃肠不适等不良反应，甚至可能引起脑、心、肝、肺等多种组织器官的损伤和疾病[3-4]。因此，2005年版《中国药典》取消了药材的硫磺熏蒸养护法。但在药材加工过程中，过度使用硫磺熏蒸现象屡禁不止，滥用硫磺熏蒸中药材的问题十分严重。如中央电视台曾经报道甘肃岷县“毒当归”事件。2010年版《中国药典》在附录中增加了蒸馏-碘滴定法测定二氧化硫残留量，2011年国家食品药品监督管理局制订中药材及其饮片二氧化硫残留限量标准，对《中国药典》收载的山药、牛膝、粉葛、甘遂、天冬、天麻、天花粉、白及、白芍、白术、党参等11味药材及其饮片品种项下增加“二氧化硫残留量”检查项目，限度为“二氧化硫残留量不得超过400mg/kg”，对其他中药材及饮片，在《中国药典》“药材和饮片检定通则”中增加“除另有规定外，中药材及饮片二氧化硫残留量不得超过150mg/kg”的规定。2015版《中国药典》作为第一法，增加了蒸馏-酸滴定法。
紫苑为菊科多年生草本植物紫苑的干燥根及根茎，别名青苑、还魂草等，具有润肺下气、止咳祛痰的功效，主治气逆咳嗽、痰叶不利、肺虚久咳、痰中带血等症，是临床常用的润肺祛痰止咳药[5]。在《中国药典》中未涉及到该品种的二氧化硫残留量，研究依据《中国药典》2015年版四部附录中二氧化硫残留量测定法第一法（酸碱滴定法）及标准规定，以市售中药饮片紫菀作为试验样品，采用酸碱滴定法对二氧化硫残留量进行测定，并探讨滴定法在中药材二氧化硫残留量测定中应用优劣[6]。
1 仪器和材料
1.1 仪器 Sartorius电子天平（精度十万分之一）；两颈圆底烧瓶；2ml微量滴定管；25ml蓝线滴定管；竖式回流冷凝管；带刻度分液漏斗；磁力搅拌器。
1.2 材料 紫菀（批号：20150310，购自广州清平药材市场）；氢氧化钠滴定液经双人滴定配制（201525651）（F=1.013），标定浓度：0.1mol/L。所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照溶液配制 取无水亚硫酸钠约0.50236g，精密称定，置50ml量瓶中，加0.05%EDTA溶液稀释至刻度，摇匀，作为无水亚硫酸钠对照贮备液（浓度为10.0472mg/ml）。分别精密量取无水亚硫酸钠对照贮备液0.05、0.1、0.25、1、2、3ml，置10ml容量瓶中，加0.05%EDTA溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液Ⅰ～Ⅵ，静置，备用。
2.2 滴定方法 取粉碎并过二号筛的紫菀约10g，精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水350ml。打开回流冷凝管开关，将冷凝管的上端口处连接一橡胶导气管置于1000ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液。在吸收液中加人3 滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml），并用0.01mol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2 L/min，打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L ）1.0ml流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5h后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定液（0.01mol/L） 滴定，至黄色持续时间20s不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。
2.3 线性关系考察 分别精密量取对照品溶液Ⅰ～Ⅵ各5ml置两颈圆底烧瓶中，按“2.2”的实验操作，用氢氧化钠滴定液（0.01015mol/L）滴定，记录滴定体积，并将滴定结果用空白实验校正。记录滴定体积，以加入无水亚硫酸钠对照溶液的量（x）为横坐标，滴定体积（Y）为纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程：Y=1.4055X+0.0221，R2=0.9998。结果表明，无水亚硫酸钠浓度在0.05～3 mg/ml之间与其滴定体积线性关系良好。见表1、图1。 2.4 检测限和定量限 参照2015年版《中国药典》四部药材和饮片检定通则，根据二氧化硫最大残留量不得过150mg/g。本实验中，最低浓度为0.05mg/ml，此时折算出二氧化硫的的量为12.5mg/kg，低于国家标准规定含量的十分之一，参照中国食品药品检定研究院的相关文件与文献报道，该浓度为报告检测限的浓度，报告检测限的三倍，即37.5 mg/kg为本方法的定量限。
2.5 重复性试验 取紫菀细粉6份，每份约10g，精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水350ml，按“2.2”操作，用氢氧化钠滴定液（0.01013mol/L）滴定，记录滴定体积，并将滴定结果用空白实验校正，计算二氧化硫残留量，RSD为2.8%，表明本实验方法的重复性良好。见表2。
2.6 准确度（加样回收率试验） 取已知含量的紫菀细粉6份，每份约5g，精密称定，分别精密加入无水亚硫酸钠溶液（浓度为1.00472mg/ml，相当于二氧化硫0.51033mg/ml）3ml，按“2.2”操作，用氢氧化钠滴定液（0.01013mol/L）滴定，记录滴定体积，并将滴定结果用空白实验校正，结果见表3。
由表3可知，回收率在92.16%～102.36%之间，平均回收率为97.3%，RSD为3.8%，符合《中国药典》的相关要求。
3 讨论
酸碱滴定法操作简单，容易掌握，特别是对于贫困边远欠发达地区，能作为有效方法对硫磺熏蒸进行监管。但实验室利用酸碱滴定法测定其他中药材二氧化硫残留时发现有如下几方面的缺陷。部分药材在蒸馏过程中容易起泡，如人参，因此建议在蒸馏时加入防泡剂，防止爆沸；部分品种有测定终点不明显的现象，如丹参。此外，在天麻的二氧化硫残留量测定时，发现回收率非常低，平均回收率才60%左右，原因需要进一步研究。
研究参照2015版《中国药典》所载方法，采用碱滴定法测定紫宛中二氧化硫残留量，方法简单结果准确可靠。该方法的优点在于检测所用仪器较为简单、操作简便快捷，对检验人员要求较低，可用于条件受限的偏远地区中药材加工存储过程中二氧化硫残留量的初步控制。
参考文献
[1] 单秀明，吴爱英，郭楠. 100批中药材中二氧化硫残留量的考察[J]. 中国药师，2014：17（1）：163-164.
[2]皮文霞，韦汉燕，蔡黎明，等. 滴定法及离子色谱法测定中药二氧化硫残留量的对比实验[J]. 时珍国医国药，2014，25（5）：1197-1199.
[3] 陆兔林，宁子碗，单鑫，等.硫磺熏蒸对中药材化学成分和药理作用影响的研究进展[J].中国中药杂志，2014，39（15）：2796-2800.
[4] 贾云龙，侯福才. 目前市场上山药中二氧化硫残留测定[J]. 临床合理用药，2014，7（7）：95.
[5] 侯海燕，陈立，董俊兴.紫莞化学成分及药理活性研究进展[J]. 中国药学杂志，2006，41（3）：161-163.
[6] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典（四部） [S]. 北京：中国医药科技出版社，2015.
（收稿日期：2016.04.26）
【关键词】 紫菀；二氧化硫；滴定
【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）12-0033-02
Abstract：Objective To establish a method for determination the residues of sulfur dioxide.in Aster by base titration. Methods The method was applied to determinate the residues of sulfur dioxide in aster， the repeatability， linearity， etc. Factors， which were investigated.Results The linear relationship with the amount of good， y=1.4055x+0.0221， r2=0.9998. Recovery rate between the 92.16%～102.36% and reproduce well （RSD=2.8%，n=6）， and the detection limit is 12.5mg/kg. Conclusion the method is simple and accurate.
Keywords：aster；sulfur dioxide；titration
硫磺熏蒸中药材具有防虫、杀虫、防腐等作用，也是中药材有效的干燥方法之一[1-2]。部分中药材加工过程中，多会采用硫磺熏蒸作为售前的处理程序之一。研究表明，药材中二氧化硫过量残留不仅可破坏中药的有效成分，而且对人类健康造成严重威胁，引起服用者咽喉疼痛、胃肠不适等不良反应，甚至可能引起脑、心、肝、肺等多种组织器官的损伤和疾病[3-4]。因此，2005年版《中国药典》取消了药材的硫磺熏蒸养护法。但在药材加工过程中，过度使用硫磺熏蒸现象屡禁不止，滥用硫磺熏蒸中药材的问题十分严重。如中央电视台曾经报道甘肃岷县“毒当归”事件。2010年版《中国药典》在附录中增加了蒸馏-碘滴定法测定二氧化硫残留量，2011年国家食品药品监督管理局制订中药材及其饮片二氧化硫残留限量标准，对《中国药典》收载的山药、牛膝、粉葛、甘遂、天冬、天麻、天花粉、白及、白芍、白术、党参等11味药材及其饮片品种项下增加“二氧化硫残留量”检查项目，限度为“二氧化硫残留量不得超过400mg/kg”，对其他中药材及饮片，在《中国药典》“药材和饮片检定通则”中增加“除另有规定外，中药材及饮片二氧化硫残留量不得超过150mg/kg”的规定。2015版《中国药典》作为第一法，增加了蒸馏-酸滴定法。
紫苑为菊科多年生草本植物紫苑的干燥根及根茎，别名青苑、还魂草等，具有润肺下气、止咳祛痰的功效，主治气逆咳嗽、痰叶不利、肺虚久咳、痰中带血等症，是临床常用的润肺祛痰止咳药[5]。在《中国药典》中未涉及到该品种的二氧化硫残留量，研究依据《中国药典》2015年版四部附录中二氧化硫残留量测定法第一法（酸碱滴定法）及标准规定，以市售中药饮片紫菀作为试验样品，采用酸碱滴定法对二氧化硫残留量进行测定，并探讨滴定法在中药材二氧化硫残留量测定中应用优劣[6]。
1 仪器和材料
1.1 仪器 Sartorius电子天平（精度十万分之一）；两颈圆底烧瓶；2ml微量滴定管；25ml蓝线滴定管；竖式回流冷凝管；带刻度分液漏斗；磁力搅拌器。
1.2 材料 紫菀（批号：20150310，购自广州清平药材市场）；氢氧化钠滴定液经双人滴定配制（201525651）（F=1.013），标定浓度：0.1mol/L。所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照溶液配制 取无水亚硫酸钠约0.50236g，精密称定，置50ml量瓶中，加0.05%EDTA溶液稀释至刻度，摇匀，作为无水亚硫酸钠对照贮备液（浓度为10.0472mg/ml）。分别精密量取无水亚硫酸钠对照贮备液0.05、0.1、0.25、1、2、3ml，置10ml容量瓶中，加0.05%EDTA溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液Ⅰ～Ⅵ，静置，备用。
2.2 滴定方法 取粉碎并过二号筛的紫菀约10g，精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水350ml。打开回流冷凝管开关，将冷凝管的上端口处连接一橡胶导气管置于1000ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液。在吸收液中加人3 滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml），并用0.01mol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2 L/min，打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L ）1.0ml流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5h后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定液（0.01mol/L） 滴定，至黄色持续时间20s不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。
2.3 线性关系考察 分别精密量取对照品溶液Ⅰ～Ⅵ各5ml置两颈圆底烧瓶中，按“2.2”的实验操作，用氢氧化钠滴定液（0.01015mol/L）滴定，记录滴定体积，并将滴定结果用空白实验校正。记录滴定体积，以加入无水亚硫酸钠对照溶液的量（x）为横坐标，滴定体积（Y）为纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程：Y=1.4055X+0.0221，R2=0.9998。结果表明，无水亚硫酸钠浓度在0.05～3 mg/ml之间与其滴定体积线性关系良好。见表1、图1。 2.4 检测限和定量限 参照2015年版《中国药典》四部药材和饮片检定通则，根据二氧化硫最大残留量不得过150mg/g。本实验中，最低浓度为0.05mg/ml，此时折算出二氧化硫的的量为12.5mg/kg，低于国家标准规定含量的十分之一，参照中国食品药品检定研究院的相关文件与文献报道，该浓度为报告检测限的浓度，报告检测限的三倍，即37.5 mg/kg为本方法的定量限。
2.5 重复性试验 取紫菀细粉6份，每份约10g，精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水350ml，按“2.2”操作，用氢氧化钠滴定液（0.01013mol/L）滴定，记录滴定体积，并将滴定结果用空白实验校正，计算二氧化硫残留量，RSD为2.8%，表明本实验方法的重复性良好。见表2。
2.6 准确度（加样回收率试验） 取已知含量的紫菀细粉6份，每份约5g，精密称定，分别精密加入无水亚硫酸钠溶液（浓度为1.00472mg/ml，相当于二氧化硫0.51033mg/ml）3ml，按“2.2”操作，用氢氧化钠滴定液（0.01013mol/L）滴定，记录滴定体积，并将滴定结果用空白实验校正，结果见表3。
由表3可知，回收率在92.16%～102.36%之间，平均回收率为97.3%，RSD为3.8%，符合《中国药典》的相关要求。
3 讨论
酸碱滴定法操作简单，容易掌握，特别是对于贫困边远欠发达地区，能作为有效方法对硫磺熏蒸进行监管。但实验室利用酸碱滴定法测定其他中药材二氧化硫残留时发现有如下几方面的缺陷。部分药材在蒸馏过程中容易起泡，如人参，因此建议在蒸馏时加入防泡剂，防止爆沸；部分品种有测定终点不明显的现象，如丹参。此外，在天麻的二氧化硫残留量测定时，发现回收率非常低，平均回收率才60%左右，原因需要进一步研究。
研究参照2015版《中国药典》所载方法，采用碱滴定法测定紫宛中二氧化硫残留量，方法简单结果准确可靠。该方法的优点在于检测所用仪器较为简单、操作简便快捷，对检验人员要求较低，可用于条件受限的偏远地区中药材加工存储过程中二氧化硫残留量的初步控制。
参考文献
[1] 单秀明，吴爱英，郭楠. 100批中药材中二氧化硫残留量的考察[J]. 中国药师，2014：17（1）：163-164.
[2]皮文霞，韦汉燕，蔡黎明，等. 滴定法及离子色谱法测定中药二氧化硫残留量的对比实验[J]. 时珍国医国药，2014，25（5）：1197-1199.
[3] 陆兔林，宁子碗，单鑫，等.硫磺熏蒸对中药材化学成分和药理作用影响的研究进展[J].中国中药杂志，2014，39（15）：2796-2800.
[4] 贾云龙，侯福才. 目前市场上山药中二氧化硫残留测定[J]. 临床合理用药，2014，7（7）：95.
[5] 侯海燕，陈立，董俊兴.紫莞化学成分及药理活性研究进展[J]. 中国药学杂志，2006，41（3）：161-163.
[6] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典（四部） [S]. 北京：中国医药科技出版社，2015.
（收稿日期：2016.04.26）