原位灌注大鼠肾脏冷缺血-再灌注损伤模型的建立

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缺血-再灌注损伤与急性排斥反应是影响移植肾早期功能恢复的两个主要因素。以往急性排斥反应一直是人们研究的重点,但随着对免疫排斥反应机制的深入了解、新型强力免疫抑制剂的应用,急性排斥反应已得到有效的控制。在这样的背景下,移植肾缺血-再灌注损伤对移植肾的影响就受到越来越多的重视[1],建立较可靠的移植肾缺血-再灌注损伤的动物模型,对进一步探讨移植肾缺血-再灌注损伤的发病机制及防治具有重要的意义。我们参照Takada等[2~4]报道的方法并加以改进,建立了操作简便、稳定、更符合临床肾移植实际情况的原位灌注肾冷缺血-再灌注损伤的动物模型,现报道如下。1 材料和方法1.1 实验动物 雄性SD大鼠,由本校实验动物中心提供,体质量250~300 g,自由正常饮食。1.2 模型的制作 实验组(n=20):用3%戊巴比妥钠(60mg/kg)腹腔内注射麻醉后,沿腹中线打开腹腔,游离左右肾蒂,小肠系膜根部,在右肾动脉开口上方、左肾动脉开口下方用无损伤血管夹同时夹闭腹主动脉和下腔静脉。切除右肾,从右肾动脉残端向腹主动脉内插入一根细硅胶管:用10 ml0℃的HCA肾保存液灌洗左肾,2~3 min内灌洗完毕,右肾静脉残端作为灌洗液的流出口。灌洗完毕在靠近肾门处夹闭左肾蒂,右肾动静脉残端用7-0聚丙烯线缝合结扎,松开除肾蒂处的所有血管夹,为防止肠管暴露空气时间过长,暂时先关闭腹部切口。左肾蒂阻断45 min,后拆除缝线,打开腹腔,松开血管夹,恢复肾血流,见到左肾由紫黑色转粉红色后关闭腹部切口。对照组(n=10):切除右肾,游离左肾蒂,但不作钳夹处理。
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