【摘 要】
：
目的 实验研究靶向转染survivin的小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)对膀胱癌生物学行为的影响.方法 设计1对survivin编码基因序列特异的siRNA,用脂质体转染T24膀
【机 构】
：
苏州大学附属第一医院泌尿外科,江苏省血液研究所
论文部分内容阅读
目的 实验研究靶向转染survivin的小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)对膀胱癌生物学行为的影响.方法 设计1对survivin编码基因序列特异的siRNA,用脂质体转染T24膀胱癌细胞株.采用流式细胞术检测转染效率和细胞凋亡;荧光实时定量PCR检测干扰前后survivin的mRNA表达;用survivin的siRNA片段插入空载体后建立重组载体pRNAT-U6.1/Neo-survivin.结果 脂质体转染T24细胞后的转染效率为92.3%;survivin编码基因序列特异的siRNA能有效下调survivin基因的表达,呈时间和剂量依赖性,最大效应浓度为100 nmol/L,此时survivin表达水平下调了75.91%,并显著地抑制了细胞生长,抑制率达55.29%,差异有统计学意义(P＜0.01);细胞凋亡率亦增至45.70%,与对照相比差异有统计学意义(P＜0.01).用限制性内切酶将空载体线性化,T4 DNA连接酶将siRNA片段插入空载体中,对该重组表达载体进行鉴定,获得RNA干扰质粒载体pRNAT-U6.1/Neo-survivin.结论 siRNA-survivin能显著下调膀胱癌细胞survivin基因表达水平,促进细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖,可能成为膀胱癌基因治疗的新工具.成功构建的靶向survivin基因表达的RNA干扰质粒载体为进一步应用RNA干扰技术进行survivin基因功能研究奠定了基础.
其他文献
本文以纳米SiO2改性树脂作为树脂基体,以连续碳纤维作为增强体制备复合材料,研究了纳米SiO2掺入树脂中百分含量对树脂基体与增强体之间的界面性能的影响.通过对树脂基体与增
基于“荷叶效应”,研究了在低表面能的疏水材料表面上构建微米-纳米双重粗糙结构以实现超疏水性的技术路线,开发出一种制备绝缘子超疏水涂层的工艺,用此种工艺制备的超疏水涂
目的对山东“10·21”辐射事故中2例严重受照射者进行淋巴细胞微核(MN)检测,并估算受照射剂量。方法用胞浆分裂阻滞微核(CBMN)法对2例患者(A和B)的外周血和骨髓样本分别进行M
目的 研究重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体对原代培养的神经于细胞(neural stem cells,NSC)的体外转染及其对细胞增殖、分化和迁移能力的影响.
目的:探讨近十年来胃癌临床病理特点的发展趋势.方法:以我院1994-2003年间经胃镜检查和病理证实的胃癌1765例为研究对象,分成1994-1998和1999-2003前后两组,探讨性别、年龄、
目的:探讨热休克蛋白47对转化生长因子β1(transforming growth factor β1, TGF-β1)所诱导的肝星形细胞合成I型胶原蛋白的影响.方法:以重组人1ng/mL和10ng/mL TGF-β1作用
近年来药品安全问题已逐渐成为社会的焦点。随着我国糖尿病发病率的逐年提高,降糖药的安全性越来越受重视。对糖尿病患者,在控制血糖的同时,应兼顾安全性和疗效,提倡科学降糖
目的 探讨急性下肢缺血手术与介入联合的治疗方法.方法 分析2001年1月至2006年1月收治的72例(76条肢体)急性下肢缺血患者在DSA监测下行下肢动脉重建的临床资料.72例患者手术
目的 评价急性肾动脉血栓形成及栓塞的彩色多普勒超声表现及其临床意义.方法 回顾性分析10例急性肾动脉血栓形成及栓塞患者的影像学检查结果,确诊依据为临床资料和影像学方法
[目的]比较靶控输注不同剂量舒芬太尼复合异丙酚抑制气管插管应激反应的效果.[方法]60例择期上腹部手术患者,ASA Ⅰ～Ⅱ级,随机分为3组(n=20),全麻诱导时,A组、B组、C组分别靶