【摘 要】
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目的 探讨含有淋球菌PIB(Porin IB)与NspA(Neisseria surface protein A)基因的重组腺病毒在BALB/c小鼠体内的免疫效果.方法 将30只雌性BALB/c小鼠随机分为5组,即重组腺病毒pAdEasy-1-PN低、中、高剂量组,pAdEasy-1对照组和空白对照组,在第0周和第4周以肌内注射方式免疫BALB/c小鼠两次,低、中、高组的免疫剂量分别为每只每次10
【机 构】
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518052深圳,广东医学院附属南山人民医院皮肤科,深圳大学第一附属医院(深圳市第二人民医院)皮肤科
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目的 探讨含有淋球菌PIB(Porin IB)与NspA(Neisseria surface protein A)基因的重组腺病毒在BALB/c小鼠体内的免疫效果.方法 将30只雌性BALB/c小鼠随机分为5组,即重组腺病毒pAdEasy-1-PN低、中、高剂量组,pAdEasy-1对照组和空白对照组,在第0周和第4周以肌内注射方式免疫BALB/c小鼠两次,低、中、高组的免疫剂量分别为每只每次104、106、108组织细胞半数感染量(TCID50).在免疫开始的第0、3、5周收集血清,并于第5周无菌取脾脏,分离淋巴细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测血清中特异性PIB抗体水平和特异性NspA抗体水平,采用噻唑蓝(MTT)法检测特异性淋巴细胞增殖活性,采用玻片凝集试验和补体溶菌试验检测免疫小鼠血清的抗菌活性.应用t检验处理实验数据.结果 在重组腺病毒免疫后的小鼠中均可检测出针对PIB抗原和NspA抗原的特异性细胞免疫反应和体液免疫反应.在免疫后的第3周和第5周,PIB抗体水平(F值分别为285.72和564.83,均P＜ 0.01)和NspA抗体水平(F值分别为521.57和542.61,均P＜ 0.01)在不同组别差异均有统计学意义.PIB和NspA特异性淋巴细胞刺激指数在不同组别中差异也存在统计学意义(F值分别为171.61和233.96,P＜ 0.01).免疫效果与免疫剂量呈正相关,108TCID50/(次·只)是较为合适的免疫剂量.免疫小鼠血清可凝集淋球菌,并可在补体参与下将其杀灭.结论 含有淋球菌PIB与NspA基因的重组腺病毒可在BALB/c小鼠体内产生特异性细胞免疫反应和体液免疫反应,是潜在的淋球菌疫苗。
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