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目的
建立基于羟基萘酚蓝（hydroxy naphthol blue，HNB）颜色变化的简单、灵敏和快速的环介导逆转录等温扩增技术（RT-LAMP）检测方法，应用于柯萨奇病毒A6型（coxsackievirus A6，CV-A6）的检测。
方法针对CV-A6的VP1基因设计6条特异引物，在等温条件下（63 ℃）进行50 min扩增反应。扩增前在反应体系中加入HNB，通过观察颜色变化进行检测结果判定。使用多种肠道病毒进行特异性验证，使用梯度稀释的体外转录CV-A6全VP1基因RNA进行灵敏度分析，同时与实时荧光定量逆转录PCR（rRT-PCR）检测结果进行比较，并对92份手足口病患者临床标本进行检测。
结果本研究建立的RT-LAMP方法对除CV-A6外的23种肠道病毒的检测结果均为阴性，灵敏度为100拷贝/反应，与rRT-PCR方法相当。在对92份手足口病临床标本的检测中，检测结果与rRT-PCR方法相符，Kappa值为1，灵敏度和特异性均为100%。
结论本研究建立的针对CV-A6的LAMP检测方法，特异度高，灵敏度与rRT-PCR相当，有望应用于CV-A6感染的快速筛选，具有在基层医疗卫生机构和现场推广与应用的潜力。