【摘 要】
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目的:制备高效价的抗吗啡疫苗的抗体,并对其特性进行鉴定.方法:将人工合成的6-琥珀酰吗啡(M-6-S)与BSA在pH 9.0碳酸盐缓冲液中交联成M-6-S-BSA.经凝胶柱过滤和硫酸铵法纯化后
【机 构】
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西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安市公安局刑事技术处,陕西,西安,710061;
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目的:制备高效价的抗吗啡疫苗的抗体,并对其特性进行鉴定.方法:将人工合成的6-琥珀酰吗啡(M-6-S)与BSA在pH 9.0碳酸盐缓冲液中交联成M-6-S-BSA.经凝胶柱过滤和硫酸铵法纯化后,用两种不同方案免疫BALB/c小鼠和SD大鼠,用ELISA法和中和抑制试验分别测定抗体的滴度和进行特异性鉴定;用辐射热甩尾(TF)反射试验检测M-6-S-BSA疫苗的免疫效果.结果:用合成的M-6-S-BSA疫苗连续免疫小鼠8次,所获抗血清的效价可达1:200 000,大鼠免疫4次后抗血清的效价超过1:20 000.中和抑制试验表明,抗M-6-S抗体对吗啡和与吗啡有共同母环结构的6-单乙酰吗啡、海洛因及可待因具有较高的特异性.免疫大鼠腹腔注射2 mg/kg的吗啡后,其甩尾(TF)反射受到明显抑制,最大效应百分率(%MPE)减少了74.7%,TF潜伏期回到基线水平的时间明显快于对照组.结论:成功地制备M-6-S-BSA疫苗,用其免疫小鼠和大鼠均可产生高滴度和特异性抗吗啡抗体.该抗体可明显减低大鼠对吗啡的抗伤害感受,为进一步研究吗啡疫苗抗体对抗吗啡的成瘾作用奠定了基础.
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