【摘 要】
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为了研究苹果汁生产中棒曲霉素产生菌的快速检测,利用实时PCR方法快速检测扩展青霉的可能性,对扩增条件进行优化.在polygatacturonase基因引物设计和传统PCR扩增扩展青霉DNA
【机 构】
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西北农林科技大学,Canadian Research Institute for Food Safety and Food Science Department
【出 处】
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西北农林科技大学学报（自然科学版）
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为了研究苹果汁生产中棒曲霉素产生菌的快速检测,利用实时PCR方法快速检测扩展青霉的可能性,对扩增条件进行优化.在polygatacturonase基因引物设计和传统PCR扩增扩展青霉DNA的基础上,研究实时PCR扩增时退火温度、引物浓度以及底物质量浓度对扩增效果的影响,以获得最佳的参数.结果表明,用Lightercycler实时PCR扩增扩展青霉DNA的最佳退火温度为61 ℃,最佳引物浓度为0.20～0.40 μmol/L,底物质量浓度对实时PCR扩增的影响较小.在以上参数下,可以获得良好的PCR扩增曲线、产物溶解曲线以及清晰的产物条带.研究获得的快速检测扩展青霉的实时PCR参数,可用于浓缩苹果汁工业化生产中扩展青霉的快速检测,也可作为其他微生物实时PCR检测时的方法学参考.
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