青藤碱抗肝癌作用机制研究

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目的:探讨青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株的增生和转移能力的多靶向作用机制。方法:运用噻唑蓝还原法(MTT)来检测青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株的抗增殖作用,而同时运用Transwell法来检测药物对于细胞转移能力的作用变化;间接荧光标记法测定经过不同浓度的青藤碱作用后,细胞内活性氧水平的变化;利用酶抑制动力学方法,研究青藤碱对逆转录酶的抑制作用;再通过逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹的实验来检测Hep G2细胞中凋亡蛋白水平的变化。结果:青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株具有抗侵袭及转移的治疗作用。MTT检测结果显示青藤碱对于Hep G2人肝癌细胞抗增殖作用明显,半抑制浓度IC50为(15.35±2.43)μmol/L;而Transwell法的结果显示青藤碱对癌细胞有较好的抗转移能力;青藤碱是一种有效的逆转录酶抑制剂,IC50为(21.32±2.43)μmol/L;荧光标记法检测细胞内活性氧水平随青藤碱呈浓度依赖性升高;蛋白水平测定显示青藤碱上调Hep G2人肝癌细胞CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达。结论:青藤碱可能是通过上调CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达,进而抑制人肝癌细胞的增殖和转移,调节相关信号通路,最终在分子水平证明青藤碱对Hep G2人肝癌细胞的抑制作用。
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