【摘 要】
：
目的用Tet-on慢病毒载体系统构建稳定表达弓形虫棒状体蛋白18(ROP18)的293T细胞株。方法PCR扩增ROP18基因序列插入慢病毒载体p LVCT-t TR-KRAB中,构建带有ROP18活性片段的慢
【机 构】
：
江苏大学医学院,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心,
论文部分内容阅读
目的用Tet-on慢病毒载体系统构建稳定表达弓形虫棒状体蛋白18(ROP18)的293T细胞株。方法PCR扩增ROP18基因序列插入慢病毒载体p LVCT-t TR-KRAB中,构建带有ROP18活性片段的慢病毒载体p LVCT-t TRKRAB-ROP18。经鉴定后将该重组载体(6μg)与辅助质粒ps PAX2(4μg)和p MD2.G(2μg)共同转染293T细胞,荧光显微镜下观察细胞荧光。于转染后48和72 h收集含有慢病毒颗粒上清液,感染293T细胞。以1μg/ml强力霉素(DOX)诱导293T细胞表达ROP18,荧光显微镜下观察细胞荧光,RT-PCR法检测293T细胞中的ROP18表达情况。结果 PCR扩增rop18片段为960 bp,与预期大小一致。经PCR和酶切鉴定重组慢病素载体构建成功。转染48 h后,293T细胞于荧光显微镜下可见绿色荧光。经DOX诱导24 h即可观察到293T细胞中明亮绿色荧光。RT-PCR检测结果显示,293T细胞ROP18可产生960 bp特异条带,与预期结果一致。结论采用Tet-on慢病毒载体系统构建了稳定表达弓形虫ROP18的293T细胞株。
其他文献
本文主要以唐宋诗歌中的女性意象和丑怪意象为研究对象,通过对这两类意象在诗歌中的密度和“意”的变化的分析,讨论诗歌是如何由唐音转向宋调的。第一章是对女性意象的研究,
桑杏汤出自吴鞠通的《温病条辨》,该书以三焦为辨治纲领,详论四时温病证治。桑杏汤方病位属上焦,在四时应秋季。吴瑭将三焦辨治与叶天士的卫气营血辨治规律相互交融,互参互用
2016年9月24日凌晨2时许,湖北省蔡甸监狱服刑人雷军在武汉市汉阳医院做完肾结石手术后的住院期间逃跑。事发后,在湖北省政法委的指导下,湖北省公安厅迅速召集武汉、成宁公安
云南盐化公司董事会经过审议，决定在昆明盐矿西侧新建80万t/a真空制盐项目。项目投资总额为4．68亿元。
Huntsman公司已开始对扩大其全球MDI（亚甲基二苯基二异氰酸酯）生产能力进行设计和可行性研究。该公司准备在荷兰Rozenburg新建40万t／a MDI装置，2008年内拍板，预定2011年6月投产；届
随着社会经济和科学技术的迅猛发展,不同的行业对于电能的需求不断增多,在电网的建设方面所投入的力度也不断增大。在电力工程建设的过程中,需要投入的资金量是非常大的,同时
<正>目前我国对食源性致病菌的标准检测方法一直沿用传统的细菌培养法,由于其检测过程繁琐复杂,所用试剂繁多,检测周期较长[1],已难以满足当前卫生应急检测快速诊断的需求[2]
概述了氯乙烯合成转化器的工作原理及特点，着重分析了氯乙烯合成转化器在使用中产生腐蚀渗漏的原因及影响因素，并提出了防护措施。
运用文献资料、逻辑分析等方法阐释体育行政处罚自由裁量权的概念,主张一切与体育有关的行政处罚自由裁量权都可称为体育行政处罚自由裁量权。分析其主体多元性、行使对象广
从上个世纪90年代初开始到2008年,中国体育公关经历了起步到发展的重要阶段,新媒体成为中国体育公关的重要手段,公关经验的飞跃性提升,危机公关策略的完善以及公关从业者定位