【摘 要】
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目的 利用小于扰RNA(siRNA)抑制肝癌细胞雌激素受体(ER)基因的表达,观察其受抑制对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响.方法 通过构建ER-siRNA慢病毒载体系统转染人肝癌细胞Hep3B细胞,将实验分为3组:空白对照组、阴性对照组及siRNA组,应用Western blot检测ER基因沉默的效果,用噻唑蓝(MTT)方法检测细胞增殖,用流式细胞仪观察肿瘤细胞凋亡,用Transwell侵袭实验检
【机 构】
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目的 利用小于扰RNA(siRNA)抑制肝癌细胞雌激素受体(ER)基因的表达,观察其受抑制对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响.方法 通过构建ER-siRNA慢病毒载体系统转染人肝癌细胞Hep3B细胞,将实验分为3组:空白对照组、阴性对照组及siRNA组,应用Western blot检测ER基因沉默的效果,用噻唑蓝(MTT)方法检测细胞增殖,用流式细胞仪观察肿瘤细胞凋亡,用Transwell侵袭实验检测检测Hep3B细胞体外侵袭力的改变.结果 成功构建ER基因的慢病毒siRNA载体,感染肝癌细胞明显抑制ER蛋白表达,抑制率56.64％；空白对照组、阴性对照组及小干扰RNA组MTT的吸光度(A)值分别0.68±0.11、0.60±0.13和0.49 ±0.10(P ＜0.05)；流式细胞检测S期的细胞比例分别为(35.23±4.68)％、(30.95±3.17)％和(21.88±2.13)％ (P ＜0.05)；迁移实验细胞数分别为(97.66±5.03)、(90.67±3.79)和(37.00±10.14)个(P＜0.05).结论 重组ER-siRNA慢病毒可抑制Hep3B细胞ER蛋白表达水平,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,降低肿瘤细胞侵袭能力。
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