论文部分内容阅读
目的获得重组SjLDH主要的酶动力学参数。方法分光光度计测定NADH在340nm处吸光度的变化,检测不同pH及温度下重组蛋白催化正、逆反应的效率以确定其最佳pH、最佳温度;分别固定底物NADH、丙酮酸、NAD+及乳酸浓度,分别测定丙酮酸、NADH、乳酸及NAD^+在不同浓度下的反应速度,计算机Lineweaver-Burk双倒数方程回归计算各底物的米氏常数(Km值)、最大反应速度(Vmax)。并比较各自的Vmax/Km值。结果重组蛋白酶活性为379U/mg。催化正、逆反应的最佳pH分别为pH6.0—7.0