【摘 要】
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目的：构建一个利用小鼠乳清酸蛋白（mWAP）基因座完整的上下游调控序列指导人溶菌酶（hLYZ）基因组序列在乳腺内特异性高效表达的mWAP-hLYZ杂合基因座,实现人溶菌酶的高效表达。方法：采
【机 构】
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陕西师范大学生命科学学院,军事医学科学院生物工程研究所
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目的：构建一个利用小鼠乳清酸蛋白（mWAP）基因座完整的上下游调控序列指导人溶菌酶（hLYZ）基因组序列在乳腺内特异性高效表达的mWAP-hLYZ杂合基因座,实现人溶菌酶的高效表达。方法：采用连续3步缺口修复的方法。首先,以pBR322载体作为骨架,插入预先合成的6个同源臂序列,构成能够连续进行3次缺口修复的基因抓捕载体。然后在大肠杆菌内利用λ噬菌体Red同源重组系统介导的同源重组方法：第一步,从含mWAP基因座的细菌人工染色体（BAC）上亚克隆8 kb的mWAP基因3＇端完整侧翼序列到抓捕载体上;第二步
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