【摘 要】
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目的观察N-myc下游调节基因-2(N-myc downstream regulated gene-2,NDRG2)在大鼠单侧输尿管梗阻( unilateral ureteral obstruction,UUO)模型上的表达,探讨肾脏纤维化发病的机制。方法雄性Wistar大鼠48只,数字法随机分为假手术组(24只,行左侧输尿管分离术)和手术组(24只,行左侧输尿管结扎离断术),各组大鼠分别在术后3
【机 构】
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110004 沈阳,中国医科大学附属盛京医院小儿肾内科(现工作单位:117000 本溪市中心医院儿科),110004 沈阳,中国医科大学附属盛京医院小儿肾内科,
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目的观察N-myc下游调节基因-2(N-myc downstream regulated gene-2,NDRG2)在大鼠单侧输尿管梗阻( unilateral ureteral obstruction,UUO)模型上的表达,探讨肾脏纤维化发病的机制。
方法雄性Wistar大鼠48只,数字法随机分为假手术组(24只,行左侧输尿管分离术)和手术组(24只,行左侧输尿管结扎离断术),各组大鼠分别在术后3 d、7 d、14 d、21 d各6只取材,留取左肾标本。用HE、Masson染色观察肾小管损伤的病理变化,采用Western blot、免疫组化方法检测E-cadherin和α-SMA的表达情况,从而验证造模成功。用实时定量PCR、Western blot、免疫组化验证NDRG2的表达。
结果假手术组各时间点无差异。与假手术组相比,UUO组大鼠随着梗阻时间延长,肾小管损伤程度逐渐加重,E-cadherin蛋白表达减少(P<0.05),α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。NDRG2蛋白表达在UUO组明显低于假手术组(P<0.05),随梗阻时间延长递减。用ImagePro Plus 6.0分析NDRG2免疫组织化学OD值,在21 d时最低(14.33±2.45)×10-3;Western blot结果采用目的蛋白与内参OD值之比,21 d时最低为0.03±0.01;实时PCR显示NDRG2 mRNA在UUO组显著降低(P<0.05)。
结论在UUO模型中,NDRG2表达下调,其有可能参与了肾脏纤维化的病理过程。
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