【摘 要】
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目的:探讨微小RNA-21（miR-21）对人乳腺癌细胞MCF-7和SKBR-3及其紫杉醇耐药株细胞生物学活性的影响。方法:体外研究采用紫杉醇逐步加量诱导法建立人乳腺癌细胞紫杉醇耐药株;通过
【机 构】
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蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心,蚌埠医学院生物科学系,蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金(81071848);安徽省自然科学基金(1508085MH159);安徽省教育厅自然科学重点研究项目(KJ2013A184,KJ2010A240);国家级大学生创新项目(201310367014)
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目的:探讨微小RNA-21（miR-21）对人乳腺癌细胞MCF-7和SKBR-3及其紫杉醇耐药株细胞生物学活性的影响。方法:体外研究采用紫杉醇逐步加量诱导法建立人乳腺癌细胞紫杉醇耐药株;通过观察细胞形态的变化和检测耐药基因MDR1、BCRP、MRP1的表达以鉴定耐药细胞株;检测MCF-7和SKBR-3亲本及耐药细胞中miR-21和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达水平;用miR-21抑制剂和模拟物分别转染MCF-7和SKBR-3耐药和亲本细胞株,MTT法和流式细胞术检测转染miR-21抑制剂后细胞对紫杉醇的敏感程度和细胞周期、凋亡的变化,并检测耐药基因和凋亡相关基因的表达。结果:成功建立人乳腺癌细胞紫杉醇耐药株MCF-7/PR和SKBR-3/PR,耐药细胞株中耐药基因MDR1、BCRP、MRP1表达均升高,抗凋亡基因Bcl-2升高,凋亡基因Bax下降,miR-21表达升高（P<0.05）;与对照组比较,miR-21抑制剂可提高耐药细胞株对紫杉醇的药物敏感性,增加细胞凋亡水平,增加细胞周期中Go/G1期细胞（P<0.05）,并可抑制耐药细胞株耐药基因的表达,降低Bcl-2/Bax比值（P<0.05）,而miR-21模拟物可刺激亲本细胞出现耐药细胞形态改变,并上调耐药基因的表达及Bcl-2/Bax比值（P<0.05）。结论:乳腺癌紫杉醇耐药细胞株MCF-7/PR和SKBR-3/PR中miR-21表达上调;抑制niR-21表达可逆转人乳腺癌MCF-7/PR、SKBR-3/PR细胞株对紫杉醇化疗的耐药性。
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