【摘 要】
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目的 检测口服ASS5A DNA疫苗表达产物在脾脏内的分布,为阐明口服DNA疫苗可诱导全身性免疫应答的机制提供依据.方法 将本实验室构建的pCDNA3.1+-Ag85A真核表达重组质粒转化感
【机 构】
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沈阳,沈阳医学院病原生物学教研室,中国医科大学基础医学院免疫学教研室
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目的 检测口服ASS5A DNA疫苗表达产物在脾脏内的分布,为阐明口服DNA疫苗可诱导全身性免疫应答的机制提供依据.方法 将本实验室构建的pCDNA3.1+-Ag85A真核表达重组质粒转化感受态大肠杆菌DH5a进行扩增,无内毒索抽提纯化,进一步用脂质体包裹制成口服重组Ag85A DNA疫苗.将C57BL/6小鼠随机分为2组,即生理盐水组和DNA疫苗组.分别将生理盐水和Ag85A DNA疫苗以灌胃方式投给各组小鼠,共免疫3次.每次间隔14 d,末次免疫后14 d处死小鼠,取脾,免疫组化、免疫荧光法检测Ag85A表达产物在脾脏的分布情况.结果 Ag85A重组DNA疫苗的表达产物在小鼠脾脏白髓、边缘区和红髓的脾索处有广泛分布,在边缘区及红髓的脾索处的检出强度高于自髓.免疫组化结果中边缘区与白髓比较t=3.039.P
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