己烯雌酚完全抗原的合成及分析

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以己烯雌酚(DES)?氯乙酸钠(CH2ClCOONa)和牛血清蛋白(BSA)等为主要原料,首先用氯乙酸钠修饰DES分子中的一个酚羟基从而合成单羧甲醚己烯雌酚(DES-MCME),然后以混合酸酐法将DES-MCME与载体蛋白(BSA?OVA)偶联形成完全抗原,并以紫外扫描分析完全抗原的偶联比率,再将得到的免疫原DES-BSA按免疫程序免疫新西兰白兔。结果表明己烯雌酚及其衍生物存在着顺反异构转化现象,极性有机溶剂的溶剂化作用促使顺反异构体的转化。高分辨质谱测得合成的DES-MCME相对分子质量为325。人工免疫原及包被原的最适结合比为13和10。采用间接酶联免疫测定,产生的抗血清的稀释度可以达到102400。从而建立了DES-MCME的制备方法,并通过高分辨质谱和ELISA检测方法验证了DES人工抗原的有效性,为研制DES残留免疫检测试剂盒奠定了基础。
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