【摘 要】
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目的 探讨黄芪甲苷对局灶性脑缺血后适应中Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键因子表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注模型组(I/R组)、缺血后适应组(IPC)、黄芪甲苷(低、中、高)+缺血后适应组(IPC+AS-IV10组、IPC+AS-IV20组、IPC+AS-IV50组)、尼莫地平+缺血后适应组(IPC+Nim组),共7组;采用线栓法制作大脑中动脉闭塞后缺血再灌注模型;对各组大鼠进行神经功能损伤评分,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TCC)
【机 构】
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安徽中医药大学第二附属医院 药学部,安徽 合肥 230061;安徽中医药大学 药学院,安徽 合肥 230061
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目的 探讨黄芪甲苷对局灶性脑缺血后适应中Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键因子表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注模型组(I/R组)、缺血后适应组(IPC)、黄芪甲苷(低、中、高)+缺血后适应组(IPC+AS-IV10组、IPC+AS-IV20组、IPC+AS-IV50组)、尼莫地平+缺血后适应组(IPC+Nim组),共7组;采用线栓法制作大脑中动脉闭塞后缺血再灌注模型;对各组大鼠进行神经功能损伤评分,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TCC)染色检测各组大鼠脑梗死区面积,HE染色检测各组大鼠缺血侧脑组织的病理学变化,ELISA试剂盒检测各组大鼠血清中脑组织损伤标志物大鼠源高敏c反应蛋白(hs-CRP)和大鼠源S100钙结合蛋白B(S100-B)的表达,Real time PCR和Western blot检测大鼠脑组织中Wnt家族成员3A(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA和蛋白以及磷酸化β-catenin(p-β-catenin)蛋白的表达.结果 神经损伤评分结果显示,各处理组较I/R组评分降低(P<0.05);梗死面积结果显示,IPC组、IPC+AS-IV20组、IPC+AS-IV50组、IPC+Nim组较I/R组减少,IPC+AS-IV50组、IPC+Nim组较IPC组减少(P<0.05);血清S-100B、hs-CRP含量结果显示,I/R组明显高于Sham组(P<0.05),IPC组、IPC+AS-IV10组、IPC+AS-IV20组、IPC+AS-IV50组、IPC+Nim组低于I/R组(P<0.05),IPC+AS-Ⅳ10组、IPC+AS-IV20组、IPC+AS-IV50组、IPC+Nim组低于IPC组(P<0.05);病理结果显示,各处理组较I/R组有不同程度减轻;Real time PCR和Western blot结果显示,与Sham组比较,I/R组大鼠脑组织中Wnt3a、β-catenin、BDNF mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),而p-β-catenin蛋白升高(P<0.05);与I/R组比较,IPC组及各处理组Wnt3a、β-catenin、BDNF mRNA和蛋白的表达增加(P<0.05),而p-β-catenin蛋白水平下降(P<0.05);与IPC组比较,IPC+AS-IV20组、IPC+AS-IV50组、IPC+Nim组大鼠脑组织中BDNF、Wnt3a、β-catenin mRNA升高(P<0.05),大鼠脑组织中Wnt3a、β-catenin mRNA的表达呈现黄芪甲苷剂量依赖;与IPC组比较,IPC+AS-IV50组、IPC+Nim组Wnt3a、β-catenin、BDNF蛋白增加(P<0.05),p-β-catenin蛋白下降(P<0.05).结论 黄芪甲苷可通过Wnt/β-catenin通路增强缺血后适应对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥的神经保护作用,从而减轻神经损伤.
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