论文部分内容阅读
目的探究不同浓度肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人眼睫状体肌细胞体外存活率及其活性的影响。方法本研究选取的研究标本为体外培养的人眼睫状体肌细胞,观察组细胞来源于2012年1月至2014年1月广东省增城市人民医院眼科收治的10例(10只眼)原发性青光眼患者,患者眼压药物控制效果不佳,采用手术方法治疗;对照组细胞来源于2012年1月至2014年1月广东省增城市人民医院非眼部疾病死亡的患者。在细胞培养4~5代后,以5,10,15,25 ng/ml等4个浓度梯度将TNF-α加入体外培养的人眼睫状体肌细胞培养液中,分别于24,48,72 h后进行肌力检查,流式细胞检测细胞的存活率和活性。两组细胞的存活率和细胞活性以均数±标准差(x珋±s)的形式表示,并采用三因素重复测量方差分析的方法进行组间比较;当比较结果有统计学意义时,进一步采用SNK的方法进行组内比较。结果 TNF-α浓度为5 ng/ml时,细胞培养24,48,72 h后观察组细胞的存活率分别为(49.20±6.14)%,(55.63±4.21)%,(59.74±5.78)%,对照组细胞的存活率分别为(72.65±10.05)%,(75.93±11.25)%,(86.44±13.95)%;TNF-α浓度为10 ng/ml时,细胞培养24,48,72 h后观察组细胞的存活率分别为(61.24±8.52)%,(72.69±10.95)%,(83.66±12.47)%,对照组细胞的存活率分别为(85.94±15.87)%,(89.41±15.92)%,(93.67±17.25)%;TNF-α浓度为15 ng/ml时,细胞培养24,48,72 h后观察组细胞的存活率分别为(50.21±6.04)%,(57.28±5.09)%,(61.05±6.89)%,对照组细胞的存活率分别为(70.59±9.85)%,(72.65±10.96)%,(80.26±12.94)%;TNF-α浓度为25 ng/ml时,细胞培养24,48,72 h后观察组细胞的存活率分别为(40.16±3.26)%,(48.22±4.15)%,(50.46±4.65)%,对照组细胞的存活率分别为(69.36±8.85)%,(72.83±9.98)%,(79.84±11.54)%。对照组细胞的存活率高于观察组,差异有统计学意义(F=24.5,P<0.05)。不同时间、不同TNF-α浓度时观察组细胞的存活率比较,差异有统计学意义(F=11.30,P<0.05),且在TNF-α浓度为10 ng/ml时细胞的存活率最高,与其他3种浓度比较,差异有统计学意义(t=2.86,2.23,3.82;P<0.05)。不同时间、不同TNF-α浓度时对照组细胞的存活率比较,差异有统计学意义(F=12.21,P<0.05),在TNF-α浓度为10 ng/ml时细胞的存活率最高,与其他3种浓度比较,差异有统计学意义(t=2.87,3.22,3.34,P<0.05)。TNF-α浓度为5 ng/ml时,细胞培养24,48,72h后观察组细胞的活性分别为(120.33±14.96)%,(135.92±18.55)%,(140.32±19.58)%,对照组细胞的活性分别为(150.26±19.65)%,(173.35±22.57)%,(191.33±24.71)%;TNF-α浓度为10ng/ml时,细胞培养24,48,72 h后观察组细胞的活性分别为(135.45±19.32)%,(176.95±23.64)%,(200.55±26.87)%,对照组细胞的活性分别为(185.25±25.43)%,(192.63±25.96)%,(200.45±26.45)%;TNF-α浓度为15 ng/ml时,细胞培养24,48,72 h后观察组细胞的活性分别为(130.40±16.95)%,(150.26±21.54)%,(177.89±23.21)%,对照组细胞的活性分别为(140.26±17.84)%,(170.65±21.33)%,(182.26±23.85)%;TNF-α浓度为25 ng/ml时,细胞培养24,48,72 h后观察组细胞的活性分别为(106.85±10.69)%,(115.35±11.47)%,(120.42±11.53)%,对照组细胞的活性分别为(135.98±16.33)%,(165.20±21.06)%,(174.35±21.84)%,对照组的细胞活性高于观察组,差异有统计学意义(F=19.20,P<0.05)。不同时间、不同TNF-α浓度时观察组细胞的活性比较,差异有统计学意义(F=12.30,P<0.05),在TNF-α浓度为10 ng/ml时细胞的活性最高,与其他3种浓度比较,差异有统计学意义(t=2.96,2.02,3.41;P<0.05)。不同时间、不同TNF-α浓度时对照组细胞的活性比较,差异有统计学意义(F=14.31,P<0.05),在TNF-α浓度为10 ng/ml时细胞的活性最高,与其他3种浓度比较,差异有统计学意义(t=2.72,3.12,3.74;P<0.05)。结论 TNF-α浓度为10 ng/ml时人眼睫状体肌细胞的存活率及其活性最高,浓度为25 ng/ml时细胞的存活率及其活性最低;且随着时间的增加,人眼睫状体肌细胞的存活率和活性都在增加。