论文部分内容阅读
目的 通过构建Cav1．3基因K228E突变，观察K228E突变对L-型钙通道电生理特性及蛋白表达和转运的影响。确定钙通道α1亚基结构域IS4段上N-端带正电荷的氨基酸对该通道电生理学特性的作用，从而为创建钙通道起搏器奠定基础。方法①一步法快速定点诱变构建Cav1．3基因K228E突变体的真核表达载体；②膜片钳观察突变钙通道电流，激光共聚焦技术观察突变钙通道蛋白在细胞内的表达和定位。结果①检测表达于HEK293细胞上的L-型钙电流：转染野生型Cav1．3质粒和相关亚基质粒，可检出L型钙电流，其半激活电压V