【摘 要】
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目的 采用慢病毒载体构建稳定过表达载脂蛋白A1 (apolipoprotein A1,ApoAl)基因的SIHA、HELA细胞系,为研究ApoA1在宫颈癌中的作用机制奠定基础.方法 构建过表达ApoA1基因的慢
【机 构】
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100006,首都医科大学附属北京妇产医院妇科肿瘤科
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目的 采用慢病毒载体构建稳定过表达载脂蛋白A1 (apolipoprotein A1,ApoAl)基因的SIHA、HELA细胞系,为研究ApoA1在宫颈癌中的作用机制奠定基础.方法 构建过表达ApoA1基因的慢病毒载体,感染SIHA、HELA细胞并进行嘌呤霉素抗性筛选,构建稳定过表达ApoA1基因的SIHA、HELA细胞系,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot方法检测ApoAl mRNA和蛋白的表达水平.结果 RT-qPCR显示SIHA及HELA细胞转染组中ApoA1mRNA表达量较阴性对照组明显提高(P＜0.01),Western blot提示ApoA1蛋白在SIHA及HELA细胞中低表达,转染组ApoA1蛋白水平的表达明显高于对照组.结论 成功构建稳定过表达ApoA1基因的宫颈癌SIHA、HELA细胞系.
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