马疱疹病毒1型gD基因主要中和抗原区原核表达载体的构建和表达

来源 :新疆农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sketchupbim

【摘要】

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根据GenBank上已发表的马疱疹病毒1型（EHV-1）和马疱疹病毒4型（EHV-4）gD基因序列，设计一对特异性引物。将扩增的EHV-lgD基因片段克隆至pET-30a表达载体，筛选获得重组质粒pET-30a-gD

【作者】

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孙建华何晶石明徐全圆杨夷平冉多良

【机构】

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新疆农业大学动物医学学院

【出处】

：

新疆农业大学学报

【发表日期】

：

2013年2期

【关键词】

：

马疱疹病毒原核表达 GD基因 equine herpesviruses prokaryotic expression gD gene

【基金项目】

：

科技部一国家星火计划重大专项（2011GA890008）,新疆维吾尔自治区重大专项（2011130101-1-6）

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根据GenBank上已发表的马疱疹病毒1型（EHV-1）和马疱疹病毒4型（EHV-4）gD基因序列，设计一对特异性引物。将扩增的EHV-lgD基因片段克隆至pET-30a表达载体，筛选获得重组质粒pET-30a-gD。经鉴定证明pET-30a-gD原核载体构建成功。将其转化入BL-21大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达，并对培养时间、IPTG诱导浓度等培养条件进行优化，收集菌液进行SDS-PAGE检测，结果显示pET-30a-gD获得了高效融合表达，其表达的蛋白分子量约为29kD。Western blot分

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