一种筛选明胶酶抑制剂的微量分析方法

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目的:建立一种通用的微量分析法筛选明胶酶抑制剂。方法:以琥珀酰明胶为底物,在pH=8.5,含Ca^2+ 10mmol·L^-1的50mmol·L^-1硼酸缓冲液中与明胶酶在37℃反应30min,然后加入0.03%的TNBSA,室温放置20min,在450nm处测定吸收度。结果:本方法对明胶酶的检测限为7.5ng,灵敏度随反应时间的延长而增加,吸收度在0-360min内与时间成线性,在7.5-480ng内与明胶酶的量成线性;以1,10-二氮菲为对照进行抑制率测定的日内及日间精密度RSD分
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