毕赤酵母基因操作技术的改进及其在水蛭素表达中的应用

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangshuxi
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毕赤酵母是日益受到重视的基因工程受体菌,但是目前尚没有一种简便、高效的转化方法,也没有一种稳定、可靠的菌落PCR方法.本文通过在通常筛选重组子的MD培养基中增添lmol/L山梨糖醇使毕赤酵母电穿孔转化效率提高10倍以上.并比较系统地分析了其他影响电穿孔转化效率的因素,如毕赤酵母生长状况即OD600,不同的整合位点(BglⅡ、Sac Ⅰ、Sal Ⅰ、Stu Ⅰ),及不同的毕赤酵母受体菌(GS115和KM71)等.本文描述的转化方法所能达到的转化效率比目前大多数文献报道的效率要高,可使每微克质粒DNA产生的整
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