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目的
揭示长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)Co7Rik的表达特征及其在肝脏糖异生中的潜在作用。
方法建立饥饿-再进食动物模型、高脂饮食诱导的肥胖模型,qPCR法检测LncRNA-Co7Rik表达变化;分离C57BL/6J小鼠不同部位组织,检测其组织表达规律。原代分离小鼠肝脏原代细胞,分别给予二丁酰环腺苷酸(db-cAMP)、Forskolin、地塞米松、Hydrocortisone等药物刺激,揭示生糖信号对LncRNA-Co7Rik表达的影响。采用核质分离法检测LncRNA-Co7Rik在细胞核/细胞质中的分布特征,进行亚细胞定位。
结果动物模型研究显示LncRNA-Co7Rik在饥饿0 h、2 h、5 h、16 h及再进食20 h的表达量分别为1.00±0.61、2.98±0.87、3.41±0.98、6.73±1.21、1.53±0.78(均P<0.05),表明LncRNA-Co7Rik的表达水平随饥饿进程显著升高,在再进食后恢复正常水平。且与正常对照组相比,高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏中LncRNA-Co7Rik的表达明显上调(1.00±0.21对2.92±0.63, P<0.01)。不同组织定量表明LncRNA-Co7Rik在肝脏组织中特异性表达,表达量是其他组织的3~4倍(P<0.05);体外研究发现,LncRNA-Co7Rik的表达受糖异生信号调控,提示其可能参与糖异生过程;亚细胞定位揭示LncRNA-Co7Rik主要分布于细胞核中,提示其可能在基因转录水平发挥作用。
结论LncRNA-Co7Rik是一个受生糖信号调控的肝脏特异性长链非编码RNA,并可能参与糖异生生理、病理过程。