葡萄糖对不同氧浓度下内皮祖细胞表达低氧诱导因子-1α的影响

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目的

观察葡萄糖对低氧(1%氧浓度)和常氧(21%氧浓度)状态下内皮祖细胞表达低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨低氧在糖尿病周围血管病发生中的可能作用。

方法

常规培养健康人外周血来源的内皮祖细胞,加入不同浓度葡萄糖(5、10、33 mmol/L)分为A、B、C 3组,并在常氧和低氧条件下分别进行培养。实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测内皮祖细胞表达HIF-1α及VEGF的水平,免疫印迹法检测HIF-1α蛋白表达,ELISA法检测VEGF分泌水平。

结果

(1)低氧组表达HIF-1α mRNA(A、B和C组分别为1.25±0.34、1.35±0.26和0.75±0.22)高于常氧组(A、B和C组分别为1.03±0.25、1.21±0.28和0.61±0.17),差异具有统计学意义(A、B和C组t值分别为1.96,2.11,1.89,均P<0.05);而在相同氧浓度下,B组的内皮祖细胞表达HIF-1α mRNA高于A组和C组,差异具有统计学意义(低氧组F=23.54,P<0.01;常氧组F=29.46,P<0.01)。(2)在相同葡萄糖浓度下,低氧组和常氧组VEGF的蛋白表达差异无统计学意义(t值分别为0.933、1.258和1.001,均P>0.05)。在低氧浓度下,VEGF的蛋白表达A、B和C组分别为2953±237、2473±205和1768±195,差异具有统计学意义(F=137.43,P=0.000);在常氧浓度下,A、B和C组VEGF蛋白分别为2868±247、2377±197和1844±203,F=97.96,P=0.000。

结论

高糖对低氧条件下的内皮祖细胞具有毒性作用,能减弱其表达HIF-1α和VEGF,可能在糖尿病周围血管病的发生中发挥一定作用。

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