【摘 要】
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以大肠杆菌K12菌株，总DNA为模板，利用PCR技术扩增了编码天冬氨酸激酶的lysC基因。序列分析结果表明，目的基因含有1350个核苷酸（包括起始密码和终止密码），与文献报道相比，核苷酸序列
【机 构】
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以大肠杆菌K12菌株，总DNA为模板，利用PCR技术扩增了编码天冬氨酸激酶的lysC基因。序列分析结果表明，目的基因含有1350个核苷酸（包括起始密码和终止密码），与文献报道相比，核苷酸序列同源率为99．6％，推测的氨基酸序列与报道的相比，同源率为99．3％利用定点突变方法，将核苷酸序列的第1055位的C变成T，从而引起第352位的苏氨酸变为异亮氨酸，以改变天冬氨酸激酶对赖氨酸反馈抑制的敏感性。
The lysC gene encoding aspartokinase was amplified by PCR using E. coli K12 strain and total DNA as a template. Sequence analysis showed that the target gene contained 1350 nucleotides (including start codon and stop codon), compared with the reported in the literature, the nucleotide sequence homology was 99.6%, and the deduced amino acid sequence was similar to the reported phase The homology was 99.3%. By using the site-directed mutagenesis method, the C at position 1055 of the nucleotide sequence was changed to T, and the threonine at position 352 was changed to isoleucine to change asparagus Sensitivity of L-kinases to Lysine Feedback Inhibition.
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