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目的：制备Ni^3＋螯合金属层析填料，分离HSP65-MUC1-histag基因工程蛋白质。方法：应用Sepharose 4B作为载体，亚氨基二乙酸（IDA）为起始材料合成金属鳌合层析填料，同时应用5Br-PADAP-阶导数光度法对Np的吸收峰进行鉴定和定量。最后应用制备的Ni^2＋-Sepharose4B纯化HSP65MUC1-histag。结果：Ni^2＋最佳吸收峰为574nm，凝胶中螯合的Ni^2＋为5．2mg·g^-1，Ni^2＋-Sepharose 4B金属螯合亲和层析纯化重组蛋白纯度