【摘 要】
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目的 探索苯甲酸钠(NaB)对大鼠脊髓损伤(SCI)的保护作用及相关机制.方法 用Allen法制作SCI模型,并随机分为模型组和实验组,每组12只;另取12只正常SD大鼠只进行椎板切除,作为
【机 构】
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中南大学 湘雅海口医院 骨科中心,海南 海口570208
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目的 探索苯甲酸钠(NaB)对大鼠脊髓损伤(SCI)的保护作用及相关机制.方法 用Allen法制作SCI模型,并随机分为模型组和实验组,每组12只;另取12只正常SD大鼠只进行椎板切除,作为对照组.对照组和模型组均灌胃给予等量0.9％NaCl,qd,连续3 d;实验组给予0.2 g·kg-1 NaB,qd,连续3 d.用Basso-Beatlie-Bresnahan(BBB)评分评价各组大鼠下肢运动功能,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测线粒体凋亡因子,如活性氧(ROS)、胱氨酸酶激活剂(Smac)/低等电点IAP直接结合蛋白(Diablo)、细胞色素c(Cyt-c)、FAS配体(FASL)、凋亡诱导因子(AIF)、Smac、高温应激蛋白A2(HtrA2)及半胱天冬酶8(Caspase-8)含量,用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)检测线粒体膜电位,用免疫荧光染色观察线粒体凋亡蛋白Smac/Diablo、Cyt-c和AIF的表达情况,用Western Blot检测线粒体凋亡蛋白Cyt-c、Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况,用Nissl染色观察活细胞数目.结果 BBB评分显示:干预后第14天,NaB能有效地提高SCI大鼠下肢运动功能.ELISA显示:NaB能明显地抑制ROS、Smac/Diablo、Cyt-c、FASL及Caspase-8含量,提高SMAC和HtrA2含量.JC-1法显示:NaB有效地提高脊髓神经元线粒体膜电位.免疫荧光染色显示:NaB明显降低凋亡因子Smac/Diablo、Cyt-c和AIF表达.Western Blot结果显示:NaB明显地降低Cyt-c、Caspase-3和Bax蛋白表达,提高Bcl-2表达.Nissl染色显示:NaB治疗后可显著提高脊髓组织的活细胞数.结论 NaB对大鼠下肢运动功能具有一定的促恢复作用,可能是通过抗线粒体凋亡途径发挥作用.
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