【摘 要】
：
目的 研究nephrin在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导足细胞凋亡中的作用,以及可能的分子机制.方法 体外培养永生化小鼠足细胞( MPC),以不同浓度AngⅡ处理MPC和10-8 mol/L AngⅡ刺激
论文部分内容阅读
目的 研究nephrin在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导足细胞凋亡中的作用,以及可能的分子机制.方法 体外培养永生化小鼠足细胞( MPC),以不同浓度AngⅡ处理MPC和10-8 mol/L AngⅡ刺激不同时间,用流式细胞仪检测细胞凋亡率；实时定量PCR、免疫荧光和Western印迹法检测nephrin的表达和分布；Western印迹法检测Akt磷酸化水平.脂质体法转染pcDNA3.1-mNPHS1质粒,G418筛选稳定转染细胞系.用Akt抑制剂LY294002或与AngⅡ共孵育刺激MPC和pcDNA3.1 -mNPHS1转染细胞,检测Akt磷酸化水平和细胞凋亡率.结果 (1)AngⅡ以剂量和时间依赖方式诱导MPC凋亡.AngⅡ受体拮抗药氯沙坦与AngⅡ共孵育18 h,显著降低AngⅡ单独刺激的足细胞凋亡率(P＜0.05).(2)10-8 mol/L AngⅡ刺激12 h后,nephrin mRNA和蛋白较对照组显著降低,24 h nephrin mRNA约为正常对照的50％(P＜0.05).正常足细胞nephrin主要分布于核膜周围的胞质和细胞膜,随刺激时间延长,胞膜和胞质nephrin表达逐渐降低.(3)10-8 mol/L AngⅡ刺激15 min后,Akt磷酸化显著降低,约为正常对照细胞的50％(P＜ 0.01).(4)AngⅡ与LY294002共孵育12 h后,细胞凋亡率显著高于AngⅡ和LY294002单独刺激(均P＜0.05).(5)pcDNA3.1-mNPHS1稳定转染显著上调足细胞Akt磷酸化水平(P＜0.05),抑制AngⅡ诱导的细胞凋亡(P＜0.05).结论 AngⅡ通过AngⅡ受体诱导小鼠足细胞凋亡,抑制足细胞nephrin表达.nephrin通过PI3K-Akt信号通路调节足细胞存活状态.
其他文献
目的 探讨脊髓背角卡配因在大鼠足底炎性痛形成中的作用.方法 雄性SD大鼠48只,6周龄,体重160～200 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:正常对照组(C组,n=8)、PBS组(n=16)和酵
目的 观察椎体复位融合器治疗创伤性和骨质疏松性椎体压缩骨折的生物力学性能.方法 用带有辅助撑开拉杆的镍钛温度记忆合金椎体复位融合器,在X线透视下经椎弓根入路植入实验
红寺堡灌区是宁夏扶贫扬黄工程开发建设的新灌区,是我区四个大型扬水灌区之一.为了合理开发土地资源,防治土壤次生盐渍化,通过开展该灌区地下水动态与水盐均衡研究,密切关注
目的 根据循证医学理论和原则,为急性百草枯(PQ)中毒患者制定循证治疗方案并实施相应的循证治疗,以期在目前现有证据的支持下,达到最佳化治疗的目的.方法 选择1例PQ中毒患者,
目的 探讨静脉输液过程中影响药物实际用量的因素及护理对策.方法 抽取2009年1～10月住院患者40例,随机分为对照组和实验组各20例,对2组采用不同的方法抽取药液,然后抽取抽吸完
采用铁炭内电解-UASB反应器-好氧工艺处理制药废水,实践证明是可行的.实际调试与运行结果表明,处理效果稳定,处理效率高,出水能够达标排放.
目的 探讨鼻内镜下上颌窦内侧壁入路切除上颌窦良性病变的手术径路及手术方法的可行性及疗效.方法 2003年6月至2010年8月,采用鼻内镜下经鼻腔鼻泪管前径路和鼻泪管后径路的多
目的 探讨急诊肝移植治疗急性肝功能衰竭的效果.方法 回顾分析2003年1月至2009年1月间22例急性肝功能衰竭患者急诊行肝移植的临床资料,对患者预后、存活率及并发症等情况进行
目的 探讨鼻源性视觉障碍性疾病的诊断与治疗模式.方法 回顾性分析23例(25眼)资料完整的鼻眼相关视功能障碍病例,23例均行内镜下鼻腔鼻窦探查+鼻窦开放术,其中9例行视神经管
目的:研究微滤与超滤联用技术精制金银花水提液的效果,并与醇沉法作对比。方法:采用HPLC法测定绿原酸的含量及固形物含量,通过选择适宜浓度的NaOH溶液作为清洗剂清洗膜。结果