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目的:克隆大鼠脂联素基因(Acrp30),并对载有脂联素的重组腺相关病毒(AAV)载体进行构建及鉴定。方法:根据Acrp30的基因序列设计引物,上游引入EcoR Ⅰ位点,下游引入sal Ⅰ位点,以EX—A0242-M01-Acrp30为模板扩增目的基因。将Acrp30基因克隆入pUC19载体中,获得重组质粒pUC19-Acrp30。然后用EcoRⅠ与salⅠ酶切pUC19-Acrp30及质粒pSNAV,回收酶切片段,T4DNA连接酶16℃过夜,转化大肠杆菌DH5α感受肽细胞,筛选阳性克隆获得pSNAV-A