【摘 要】
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目的 观察大鼠心搏骤停(cardiac arrest,CA)、心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)后早期,脑中颗粒酶-B(granzyme B,Gra-B)、穿孔素表达及CD8+T细胞含量的变化,探讨
【机 构】
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江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室,徐州医学院麻醉生理学教研室,徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室,221004解放军第九七医院急诊科;
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目的 观察大鼠心搏骤停(cardiac arrest,CA)、心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)后早期,脑中颗粒酶-B(granzyme B,Gra-B)、穿孔素表达及CD8+T细胞含量的变化,探讨其在CPR后脑损伤中的意义. 方法 雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为两组:复苏组和假手术组,复苏组又按取材时间不同分为12 h组、1d组、3d组3个亚组.假手术组大鼠仅进行麻醉和气管插管、血管穿刺,不进行窒息及CPR,于术后1d处死取样.以夹闭气管导管,窒息6 min的方法成功建立大鼠CPR模型后,用平衡木行走实验及肌力测定实验检测大鼠神经功能的变化.通过检测脑组织中伊文蓝(evans blue,EB)的含量说明血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的破坏程度,应用免疫组化染色,Western blot以及免疫荧光染色技术检测脑组织内CD8+T细胞浸润、Gra-B和穿孔素表达的变化以及CD8+T细胞和Gra-B的共表达情况. 结果 与假手术组比较,复苏组大鼠CPR后的感觉运动功能和肌力明显减退,其评分在第3天达到最低[复苏组(4.0±0.7)分,假手术组(0.9±0.3)分(P＜0.01)],第4、5天开始恢复.CPR后大鼠BBB通透性增大,脑皮质和纹状体中CD8+T细胞的浸润以及Gra-B的表达增多,在1 d Gra-B的表达增加最明显[皮质中1d组(0.95±0.08)比假手术组(0.35±0.09)(P＜0.05);纹状体中1d组(1.08±0.15)比假手术组(0.39±0.09)(P＜0.05)].CD8+T细胞与Gra-B在脑中共表达. 结论 CA-CPR后,大鼠脑中BBB通透性增加,CD8+T细胞浸润并释放Gra-B及穿孔素,参与脑神经损伤.
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