目的观察骨碎补总黄酮(Gusuibu,GSB)对骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)家兔骨髓间充质干细胞(Mesen-chymal mtem cells,MSCs)体外扩增及向软骨细胞分化的影响,深入探讨骨碎补防治OA的作用机理。方法选用6月龄家兔采用Hulth法建立OA模型。运用全骨髓贴壁法和密度梯度离心法分离培养OA家兔MSCs,通过流式细胞仪对其表面标志测定鉴定MSCs。运用MTT法检测不同浓度的GSB对OA家兔MSCs增殖的影响,以确定最佳促增殖添加剂量。运用流式细胞仪对细胞周期的测定来探讨GSB对OA家兔MSCs增殖周期的影响。将OA家兔MSCs分为空白对照组、经典诱导组、GSB组和经典诱导+GSB组。用免疫组织化学方检测Ⅱ型胶原的表达,阿利新蓝比色法测定GAG含量来检测GSB对OA家兔MSCs体外成软骨细胞的影响。结果经MTT法检测GSB对MSCs增殖作用,发现0.2mMGSB组的OD值较其它组明显提高。流式细胞仪对细胞周期的测定显示0.2mMGSB干预的MSCs细胞周期的比率最高(<0.05)。GSB和成软骨诱导液能增加OA家兔MSCs的活性,Ⅱ型胶原的表达,促进软骨的形成(<0.05)。结论GSB能明显促进OA家兔MSCs增殖;促进OA家兔MSCs软骨向分化。