【摘 要】
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目的: 克隆人类新基因APMCF1,原核表达并制备其特异性多克隆抗体 . 方法: 运用5′末端快速扩增方法,结合Genbank数据库进行电子拼接, 完善APMCF1的5′端序列;利用RT-PCR方法,
【机 构】
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第四军医大学西京医院病理科,第四军医大学神经科学研究所
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目的: 克隆人类新基因APMCF1,原核表达并制备其特异性多克隆抗体 . 方法: 运用5′末端快速扩增方法,结合Genbank数据库进行电子拼接, 完善APMCF1的5′端序列;利用RT-PCR方法,扩增出APMCF1的蛋白编码cDNA序列,克隆入pGEX-KG中,构建APMCF1的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达后获得了GST-APMCF1融合蛋白,以此融合蛋白为免疫原制备兔抗血清,用Western blot 鉴定抗体特异性. 结果: 通过RACE及电子拼接,完善了APMCF1的5′端序列,其cDNA
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