【摘 要】
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目的 探讨5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dC)与曲古抑菌素A(TSA)对膀胱癌细胞中抑癌基因ALDH1a2启动子甲基化状态和基因表达及细胞凋亡的影响.方法 使用5-Aza-dC、TSA处理RT-4、253J、5637、BIU-87和T24后,应用甲基化特异性PCR(MSP)法、逆转录PCR(RT-PCR)法、Western blot法分别检测这5株膀胱癌细胞经药物干预前后ALDH1a2甲基化状态及
【机 构】
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350014,福州,福建省肿瘤医院泌尿外科,350014,福州,福建省肿瘤医院腹部外科,北京军区总医院泌尿外科,解放军总医院泌尿外科,解放军总医院泌尿外科,山东济宁第一人民医院泌尿外科,赣南医学院附属
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目的 探讨5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dC)与曲古抑菌素A(TSA)对膀胱癌细胞中抑癌基因ALDH1a2启动子甲基化状态和基因表达及细胞凋亡的影响.方法 使用5-Aza-dC、TSA处理RT-4、253J、5637、BIU-87和T24后,应用甲基化特异性PCR(MSP)法、逆转录PCR(RT-PCR)法、Western blot法分别检测这5株膀胱癌细胞经药物干预前后ALDH1a2甲基化状态及基因表达情况,应用流式细胞学检测干预前后5株膀胱癌细胞株的凋亡情况.结果 在5株膀胱癌细胞中,ALDH1a2基因表现为高甲基化表达受到抑制,TSA不影响甲基化状态,5-Aza-dC可逆转高甲基化状态并恢复基因表达,联合给予5-Aza-dC和TSA的作用和单独给予5-Aza-dC相似;TSA和5-Aza-dC均可诱导膀胱癌细胞株凋亡,早期凋亡是膀胱癌细胞株死亡的主要方式,5-Aza-dC和TSA有协同作用,3个实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 在5株膀胱癌细胞株中,ALDH1a2基因启动子甲基化可能是导致其基因失活的主要原因;5-Aza-dC单独作用和5-Aza-dC及TSA联合应用效果相似,均能恢复基因重新表达进而诱导膀胱癌细胞株的早期凋亡。
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