人原发型肝癌组织cDNA文库的构建

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:RIshan
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目的 快速构建混合人原发型肝癌组织cDNA文库。方法 从混合人原发型肝癌组织分离总RNA,以含有sfilB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含sfilA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经sfiI(IA&IB)酶切,以CHROMASPIN-400柱分级分离CD-NA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与入TriplEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库。结果经检测共获得3.96×10^6个重组子,重组率〉93%,文库经
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