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目的：建立一种汉城病毒实时荧光定量 RT-PCR 快速的检测方法。方法用专业软件设计引物和 TaqMan-BHQ探针，以人工合成 L 基因的片段作为模板，进行实时荧光定量 RT-PCR 研究。结果模板的 Ct 值与模板稀释浓度的对数存在良好的线性关系，标准曲线为Y ＝－3.607X ＋41.84，r2＝0.998，PCR 扩增效率为108.1％，其最低检出限为53.2 copies／μL。结论应用 TaqMan-BHQ1探针的实时荧光 RT-PCR 检测汉城病毒核酸，具有耗时短、灵敏度高等特点。