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目的：探讨获得高质量、数量多的原代大鼠胰岛细胞的有效可靠的方法。方法：以Ⅴ型胶原酶顺行灌注大鼠胆总管消化胰腺,以Histopaque 1077等密度区带离心法分离胰岛和胰腺腺泡组织。以双硫腙染色及免疫组化法分别鉴定提取物,胰岛素释放试验鉴定胰岛的活性。结果：经Histopaque 1077等密度区带离心法分离纯化,每只大鼠平均获取（251±26）枚胰岛。双硫腙染色后完整胰岛呈猩红色细胞团。胰岛单细胞培养及胰岛素释放试验起始2.8 mmol/L低糖培养胰岛素分泌量为（23.53±5.94