【摘 要】
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目的 探讨产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及其病毒滴度 (以 cfu表示 )的影响因素 .方法 用逆转录病毒载体 p SL XCMV,以磷酸钙共沉淀法转染 PA317包装细胞 ,挑选抗性集
【机 构】
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第四军医大学唐都医院骨科,第四军医大学基础部分子生物学教研室
【基金项目】
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全国高等学校骨干教师资助计划资助项目
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目的 探讨产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及其病毒滴度 (以 cfu表示 )的影响因素 .方法 用逆转录病毒载体 p SL XCMV,以磷酸钙共沉淀法转染 PA317包装细胞 ,挑选抗性集落 (PA317/ p SL XCMV)扩大培养后 ,进行 PA317/p SL XCMV细胞接种密度、培养温度 (37℃ ,32℃ )、纯化方法等对其培养上清中重组病毒 cfu影响的比较性研究 .结果 包装细胞的密度是影响 cfu滴度的关键因素 ;降低培养温度需延长培养时间方可提高 cfu滴度 ;对比离心纯化与过滤纯化 ,并未发现两者之间的差异 .结论 该实验结果为应用逆转录病毒载体进行的 ex vivo基因治疗实验研究提供重要参考指标
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