【摘 要】
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目的 探讨鹿茸通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对内皮祖细胞(EPCs)活性及其细胞迁移的作用机制.方法 将大鼠分为8组:空白组、模型组、鹿茸低剂量组、鹿茸中剂量组、鹿茸高剂量组、LY294002+鹿茸低剂量组、LY294002+鹿茸中剂量组、LY294002+鹿茸高剂量组.采用动脉分支分离法+维生素D3注射联合高脂喂养法建立下肢动脉硬化闭塞大鼠模型.鹿茸低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予相应剂量鹿茸灌胃给药,空白组、模型组给予等容量蒸馏水灌胃,LY294002+鹿茸低剂量
【机 构】
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山西中医药大学 太原 030024;山西中医药大学附属医院 太原 030024
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目的 探讨鹿茸通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对内皮祖细胞(EPCs)活性及其细胞迁移的作用机制.方法 将大鼠分为8组:空白组、模型组、鹿茸低剂量组、鹿茸中剂量组、鹿茸高剂量组、LY294002+鹿茸低剂量组、LY294002+鹿茸中剂量组、LY294002+鹿茸高剂量组.采用动脉分支分离法+维生素D3注射联合高脂喂养法建立下肢动脉硬化闭塞大鼠模型.鹿茸低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予相应剂量鹿茸灌胃给药,空白组、模型组给予等容量蒸馏水灌胃,LY294002+鹿茸低剂量组、LY294002+鹿茸中剂量组、LY294002+鹿茸高剂量组先行腹腔注射LY2940021 mg/(kg·d),再给予相应剂量鹿茸灌胃,连续干预28 d.流式细胞术检测外周血和骨髓中EPCs的CD133阳性细胞(CD133+)比例;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠外周血EPCs中血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)水平;免疫荧光法检测大鼠腓肠肌中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、趋化因子受体4(CXCR4)阳性细胞的表达比例;蛋白质印迹(Western Blotting)法检测PI3K、Akt蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组及给药组骨髓与外周血中CD133+细胞比例升高;与模型组比较,各给药组CD133+细胞比例均降低,其中,鹿茸高剂量组高于LY294002+鹿茸高剂量组,LY294002+鹿茸高剂量组高于鹿茸中剂量组,鹿茸中剂量组高于LY294002+鹿茸中剂量组,LY294002+鹿茸中剂量组高于鹿茸低剂量组,鹿茸低剂量组高于LY294002+鹿茸低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05).模型组及给药组VEGF、SDF-1α水平及eNOS、CXCR4阳性表达比例均较空白组降低,各给药组VEGF、SDF-1α水平及eNOS、CXCR4阳性表达比例均高于模型组,鹿茸高剂量组高于LY294002+鹿茸高剂量组,LY294002+鹿茸高剂量组高于鹿茸中剂量组,鹿茸中剂量组高于LY294002+鹿茸中剂量组,LY294002+鹿茸中剂量组高于鹿茸低剂量组,鹿茸低剂量组高于LY294002+鹿茸低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,各给药组PI3K、Akt蛋白表达水平升高(P<0.05);与各抑制剂组比较,各给药组PI3K、Akt蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 鹿茸具有促进内皮细胞增殖、迁移及改善内皮细胞功能的作用,其通过激活PI3K/Akt信号通路调控EPCs的动员及归巢促进下肢动脉硬化闭塞症大鼠的血管新生.
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