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目的：构建以巨球蛋白cDNA片段（FP6）-增强型绿色荧光蛋白（pEBFP）质粒（pEBFP／FP6双表达质粒）。方法：利用PCR技术克隆出FP6，将其克隆至pMD18-T载体中，再通过分子克隆技术将FP6插入pEBFP表达基因中，构建pEBFP／FP6质粒，双酶切和测序鉴定。结果：PCR方法能克隆FP6，并成功构建pEBFP／FP6质粒，双酶切和测序结果表明构建的pEBFP／FP6质粒完全符合设计要求。结论：利用PCR、酶切、连接反应等基因克隆手段，可以构建pEBFP／FP6双表达质粒。