【摘 要】
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目的:建立HPLC柱后修饰荧光检测法测定大鼠血浆中氢溴酸加兰他敏的方法。方法:血浆样本经甲醇直接沉淀蛋白后采用柱后修饰荧光检测法测定。色谱柱为Hypersil ODS2柱(250mm×4
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院药剂科,
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目的:建立HPLC柱后修饰荧光检测法测定大鼠血浆中氢溴酸加兰他敏的方法。方法:血浆样本经甲醇直接沉淀蛋白后采用柱后修饰荧光检测法测定。色谱柱为Hypersil ODS2柱(250mm×4.6mm,5.0μm);流动相为0.1%三乙胺溶液-甲醇(60∶40),柱温30℃;流速0.8mL·min-1,进样量20μL;荧光检测的激发波长和发射波长分别为290nm和320nm。柱后修饰采用25mmol·L-1磷酸二氢钠缓冲溶液(磷酸调节溶液pH值至3.8);流速0.2mL·min-1。结果:氢溴酸加兰他敏在3.23～828.13ng·mL-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为3.23ng·mL-1。提取回收率为84.32%～95.24%,日内精密度为2.67%～5.46%,日间精密度为3.10%～7.48%。结论:柱后修饰较大提高了氢溴酸加兰他敏检测灵敏度,该方法简便、准确、所需血浆量少,为临床进一步研究氢溴酸加兰他敏提供了基础。
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