研究人牙髓细胞(hDPC)体外培养传代过程中FAM20C的表达模式,及对hDPC成牙本质向分化诱导后FAM20C的表达变化。
方法蛋白免疫印迹法(Western blot)检测第1代至第7代(P1 ~ P7)hDPC中FAM20C蛋白的表达量;结果采用独立样本t检验;对P3代hDPC进行成牙本质分化诱导7和14 d后,反转录聚合酶链反应与Western blot检测FAM20C的mRNA和蛋白水平变化。牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白1(DMP1)表达变化,FAM20C的mRNA以及蛋白表达变化采用单因素方差分析。免疫荧光法检测FAM20C在hDPC中的分布。
结果体外培养的hDPC中可检测到FAM20C表达,表达量随细胞传代先增加后减少(tP2=-10.177,PP2= 0.001;tP3=-18.242,PP3<0.001;tP4=-19.143,PP4<0.001;tP5=-7.452,PP5= 0.002;tP6= 1.357,PP6= 0.246;tP7= 1.099,PP7= 0.334);成牙本质向分化诱导7和14 d后,FAM20C的mRNA和蛋白表达量高于未诱导组细胞(FFAM20C mRNA=86.252,PFAM20C mRNA,7 d<0.001,PFAM20C mRNA,14 d<0.001;FFAM20C蛋白= 85.569,PFAM20C蛋白,7 d= 0.002,PFAM20C蛋白,14 d<0.001)。免疫荧光结果显示,成牙本质诱导前FAM20C蛋白表达于细胞核,诱导后主要表达于细胞质,诱导14 d FAM20C在细胞质中表达量高于诱导7 d。
结论hDPC中表达FAM20C,成牙本质向分化诱导上调其表达水平,诱导后在细胞质中表达较高,提示FAM20C与hDPC的成牙本质分化相关。