【摘 要】
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目的:探究补肾活血方含药血清对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)刺激的人原代软骨细胞microRNA芯片表达的影响。方法:采用免疫组化和甲苯胺蓝染色鉴定了原代培养的人
【机 构】
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广东省第二中医院骨伤科; 广州中医药大学; 广东省中医药工程技术研究院/广东省中医药研究开发重点实验室; 南方医科大学中心实验室;
【基金项目】
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国家中医药管理局重点专科建设项目(粤中医[2012]7号);广东省中医优势病种突破项目(粤中医函[2015]19号);广东省自然科学基金(2018A030313584);广东省中医药局科研项目(20164002,20171023,20183001)
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目的:探究补肾活血方含药血清对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)刺激的人原代软骨细胞microRNA芯片表达的影响。方法:采用免疫组化和甲苯胺蓝染色鉴定了原代培养的人软骨细胞,然后采用IL-1β(10 ng/m L)刺激人原代软骨细胞,并且加入补肾活血方含药血清处理24 h。抽提细胞RNA采取反转录荧光标记microRNA,标记完成之后取样品与microRNA表达谱芯片进行杂交,并用激光扫描仪检测其杂交信号,再用相应软件分析所得数据。结果:与对照组比较,补肾活血方含药血清导致9个已知的microRNA表达呈明显上升(诱导倍数> 2)以及4个已知的microRNA表达明显下降(抑制倍数> 2)。RT-qPCR结果表明补肾活血方含药血清对miR-140-5p的表达具有明显诱导作用。结论:补肾活血方可能通过调节miR-140-5p靶向ADAMTS-5和MMP-13等基因在维持软骨细胞外基质稳态中发挥作用。
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