重组人碱性磷酸酶表达及其调节人白细胞释放TNF-α活性研究

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为获得高纯度糖化蛋白人肠碱性磷酸酶(IAP)并研究其新生物活性和药学意义,采用黑曲菌和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达嵌合人肠碱性磷酸酶(recAP),获得稳定表达细胞株和高纯度recAP.recAP呈剂量依赖型灭活内毒素(LPS),使致炎物质ATP脱磷产生终产物腺苷.利用新鲜提取的人类白细胞和脐静脉内皮细胞系(HUVECs)建立抗炎生物活性模型.ELISA结果表明,recAP在LPS存在或不存在情况下均明显抑制TNF-α分泌,ATP脱磷终产物腺苷明显抑制TNF-α分泌.非LPS依赖的recAP抑制人类白细胞TNF-α分泌是一种碱性磷酸酶新活性测定方法.
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