【摘 要】
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目的:研究microRNA-650(miR-650)在胃癌组织中的表达及其与胃癌细胞增殖、凋亡及转移的关系。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain react
【机 构】
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苏州大学,上海市奉贤区中心医院骨科,上海市奉贤区中心医院普外科
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目的:研究microRNA-650(miR-650)在胃癌组织中的表达及其与胃癌细胞增殖、凋亡及转移的关系。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测miR-650在胃癌组织标本及胃癌细胞株中的表达量,胃癌细胞株转染miR-650模拟剂以及miR-650抑制剂-LNA寡核苷酸后采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用LC-MS/MS系统定量分析筛选miR-650靶蛋白,采用蛋白质印迹检测miR-650靶蛋白RGS7的表达水平。采用裸鼠异种移植模型验证miR-650对胃癌细胞的生物学作用及其抑制剂的生物疗效。结果:胃癌细胞株KATO III、NUGC4及SGC-7901高表达miR-650,而NCI-N87及MKN-45仅微量表达miR-650。在转染miR-650抑制剂-LNA寡核苷酸后胃癌细胞增殖水平显著下降,凋亡水平显著上升。G-蛋白信号调节因子7(regulator of G-protein signaling-7,RGS7)是miR-650下游靶点之一,靶蛋白RGS7表达水平与miR-650表达水平呈负相关,miR-650抑制剂可抑制肿瘤生长。结论:胃癌细胞株中miR-650的高表达可促进胃癌细胞增殖及转移并抑制其凋亡,机制可能是通过抑制靶蛋白RGS7的表达。
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